核酸去除整體解決方案：SuperNuclease核酸酶及其殘留檢測試劑盒

核酸去除整體解決方案：SuperNuclease核酸酶及其殘留檢測試劑盒核酸，這一名詞已經家喻戶曉，尤其在接種新冠疫苗的現場发現核酸殘留，曾一度引起恐慌，隨著研究及取樣調查的深入，人們了解了產生陽性的原因，同時對生物制品的核酸殘留也有了一定的認識。用於疾病治療或預防的生物制品有著嚴格的質量控制，其中核酸殘留是各項質控標準的重中之重。生物制品的核酸殘留具有潛在的危害性。生物制品的宿主細胞大多是連續傳代細胞，擁有無限增殖的能力。殘留的宿主細胞核酸可能會在人體內造成細胞增殖失控，變為腫瘤細胞。核酸殘留可能存在感染性病毒基因，增加體內免疫反應。因此，從生物制品安全角度和科研需求，進行有效的核酸殘留去除，是非常重要的。我國參照WHO、FDA和歐盟標準，在藥典中對生物制品的核酸殘留量有明確規定。生物制品的核酸殘留主要集中在重組蛋白、抗體及疫苗的大規模純化及生產過程。藥典規定要求酵母、大腸桿菌表達的生物制品中DNA殘留量不超過10ng/劑，CHO和Vero細胞表達的EPO、狂犬疫苗、乙肝疫苗等不超過100或10pg/劑。在一般的情況下，含氯消毒液、紫外燈照射等能夠消除環境或產品表面的核酸，但是對於生物制品在生產過程中產生的核酸，就需要專業的核酸去除劑了。現在大多選擇核酸酶進行去除。核酸酶能夠消除核酸殘留的潛在危害，降低樣品粘度，提高產品純化效率。 SuperNuclease核酸酶：高效去除核酸殘留 SuperNuclease是一種來自於粘質沙雷氏菌（Serratia marcescens），經基因工程改造的核酸內切酶。SuperNuclease可降解雙鏈、單鏈、線狀、環狀的DNA和RNA，完全將核酸降解成3~5個堿基長度的5'-單磷酸寡核苷酸。因其能高效降解任何形式的DNA和RNA，又被稱為“全能核酸酶”。在菌液懸浮液中加入SuperNuclease核酸酶，發現Sino Biological的核酸酶在同濃度下降解核酸的能力比同類公司的效果要好。

SuperNuclease核酸酶的耐受性 Sino Biological從溫度、Mg離子、pH值、緩沖體系、鹽濃度等多個方面分析SuperNuclease核酸酶的耐受性，发現核酸酶能夠適用於多種實驗環境。

溫度	在50℃以內活性隨溫度線性升高
Mg2+	只有在有Mg離子時核酸酶才具有較高的活性，並在5mm時達到最大
pH	隨著pH的升高活性逐漸升高，在PH9時達到頂峰，隨後下降
緩沖體系	在同PH下Tris體系活性大於磷酸鹽體系
鹽濃度	在0.5M NaCl以內活性不受影響，當濃度大於0.5M時活性急劇下降致失活
去污劑	低濃度的去污劑對活性有促進作用，當濃度大於1/1000（w/v）時開始有抑制作用。Triton X 100和DOC抑制效果尤其明顯
SDS	任何濃度的SDS都會讓核酸酶在10min內失活
尿素	低濃度的尿素對核酸酶活性有促進作用，在4M尿素時達到最大活性，當尿素濃度達到7M以上時，核酸酶會在十分鐘內失活
硫酸銨	0-100mM內隨濃度增加活性降低，但最終保持有60%活率
活性穩定性	冷凍儲存條件下活性穩定，實驗範圍內（1年）沒有降低趨勢

SuperNuclease核酸酶的性能参数 通過以上的檢測數據，可以看出SuperNuclease核酸酶基本參數良好，穩定性高。

反應條件	最佳範圍	有效範圍
Mg²⁺	1-2mm	1-10 mm
PH	8.0-9.5	5.5-9.5
溫度	37℃	0-50℃
DTT	0-200 mm	>200 mm
鹽濃度	0-100 mm	0-400 mm
磷酸鹽	0 mm	0-50 mm
Tween 20	0-0.8%	>0.8%
Brij 35	0-0.8%	>0.8%

註：最佳範圍：SuperNuclease核酸酶活性在90%以上的反應條件；有效範圍：酶活性在15%以上的反應條件。 SuperNuclease核酸酶檢測試劑盒核酸酶屬於重組蛋白表達產品，在生物制品中同樣不能有殘留，所以在生物制品生產過程中使用核酸酶去除核酸後，還需要對核酸酶進行清除，並且進行檢測，確保產品符合生產標準要求。 Sino Biological開發的核酸酶試劑盒（KIT-SSNP01）可用於檢測和定量分析樣品中的核酸酶殘留量，具有靈敏度高、特異性好、通用性高等優點。

SuperNuclease核酸酶產品信息

貨號	名稱	規格
SSNP01	SuperNuclease	10KU/50KU/500KU
GMP-SSNP01	SuperNuclease	10KU/50KU/500KU
KIT-SSNP01	SuperNuclease ELISA Kit	1 Kit (96 Tests)

參考文獻： 1. 藥典2015（中國） 2. 藥典USP38-NF33（美國） 3. Li Si-Ming, Bai Fu-Liang, Xu Wen-Juan, et al. Removing residual DNA from Vero-cell culture-derived human rabies vaccine by using nuclease. 2014, 42(5):271-6. 4. Merten O W, Hebben M, Bovolenta C. Production of lentiviral vectors[J]. Molecular